15. pants

Testa procedūras cietā fāze:

15.1. ELISA plates pārklāj ar 50-100 ng rekombinētu AHSV-4

VP7, kas izšķīdināts karbonāta/bikarbonāta bufervielā ar pH 9,6.

Plates atstāj pa nakti inkubēties 4 °C temperatūrā;

15.2. plates trīs reizes mazgā ar 0,1× fosfātu fizioloģisko

buferšķīdumu (PBS), kas satur 0,135 M NaCl un 0,05 % (masas)

Tween 20 (PBST). Viegli uzsit pa platēm virs absorbējošā

materiāla, lai atbrīvotos no atlikušajām mazgāšanas

sastāvdaļām;

15.3. testējamos seruma paraugus un pozitīvos un negatīvos

kontrolserumus proporcijā 1 pret 5 izšķīdina 0,35 M NaCl, 0,05 %

(masas) Tween 20 un 0,1 % katona, 100 μl uz iedobi. Inkubē

vienu stundu 37 °C temperatūrā;

15.4. lai veiktu titrēšanu, sagatavo testa seruma divkārša

atšķaidījuma virknes no 1 pret 10 līdz 1 pret 280 astoņās iedobēs

(100 μl uz iedobi) - viens serums uz vienu plates aili - un tāpat

rīkojas ar pozitīvajām un negatīvajām kontrolēm. Inkubē vienu

stundu 37 °C temperatūrā;

15.5. plates piecas reizes mazgā ar 0,1× fosfātu fizioloģisko

buferšķīdumu (PBS), kas satur 0,135 M NaCl un 0,05 % (masas)

Tween 20 (PBST). Viegli uzsit pa platēm virs absorbējošā

materiāla, lai atbrīvotos no atlikušajām mazgāšanas

sastāvdaļām.