6. pants

Testa procedūras cietā fāze:

6.1. ELISA plates pārklāj ar rekombinētu AHSV-4 VP7, kas

izšķīdināts karbonāta/bikarbonāta bufervielā ar pH 9,6. Plates

atstāj pa nakti inkubēties 4 °C temperatūrā;

6.2. plates piecas reizes mazgā ar destilētu ūdeni, kas satur

0,01 % (masas) Tween 20 (mazgāšanas šķīdumu). Viegli uzsit

pa platēm virs absorbējošā materiāla, lai atbrīvotos no

atlikušajām mazgāšanas sastāvdaļām;

6.3. plates bloķē ar fosfātu fizioloģisko buferšķīdumu (PBS),

kura pH ir 7,2 un kuram pievieno 5 % (m/V) vājpiena (Nestlé

Dry Skim MilkTM), 200 μl uz iedobi, vienu stundu

37 °C temperatūrā;

6.4. atbrīvojas no bloķējošā šķīduma un viegli uzsit pa platēm

virs absorbējošā materiāla;

6.5. izmeklējamos serumu paraugus un pozitīvos un negatīvos

kontrolserumus proporcijā 1 pret 25 izšķīdina PBS, kam pievieno 5

% (masas) vājpiena un 0,05 % (masas) Tween 20, 100 μl uz

iedobi. Inkubē vienu stundu 37 °C temperatūrā;

6.6. lai veiktu titrēšanu, sagatavo divkārša atšķaidījuma

virknes no 1 pret 25 (100 μl uz iedobi) - viens serums attiecībā

uz vienu plates aili - un tāpat rīkojas ar pozitīvajām un

negatīvajām kontrolēm. Inkubē vienu stundu 37 °C temperatūrā;

6.7. plates piecas reizes mazgā ar destilētu ūdeni, kas satur

0,01 % (masas) Tween 20 (mazgāšanas šķīdumu). Viegli uzsit

pa platēm virs absorbējošā materiāla, lai atbrīvotos no

atlikušajām mazgāšanas sastāvdaļām.